jembio DNA 聚合酶—— KlenTaq1

jembio產(chǎn)品供應(yīng)

KlenTaq1是一種熱穩(wěn)定性 DNA 聚合酶，由編碼棲熱菌 DNA 聚合酶的基因的 5' 缺失表達(dá)，從而具有高度活性且熱穩(wěn)定性更高的 DNA 聚合酶活性。在反應(yīng)緩沖液 PC2 中重復(fù)暴露于 980°C 似乎不會(huì)降低酶活性。即使暴露于 990°C 后仍保留顯著的活性。全長(zhǎng)酶不能耐受這些處理。                KlenTaq1    ™ 酶缺少野生型全長(zhǎng) Taq DNA 聚合酶的 N 末端部分。該蛋白的這一部分與大腸桿菌 DNA 聚合酶 1 的 5' 核酸外切酶區(qū)域同源。  因此， KlenTaq1 ™ 與 Hoffman LaRoche 的 Stoffel 片段相似但又不同。                對(duì)于不含甘油的KlenTaq1 （目錄號(hào) 1001 NGKT）：將酶和緩沖液儲(chǔ)存在 4°C 下。儲(chǔ)存緩沖液為 50 mM 硫酸銨、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10mM 巰基乙醇、無(wú)明膠和 0.5% Thesit。                對(duì)于50% 甘油中的KlenTaq1 （目錄號(hào) 1001）：將酶儲(chǔ)存在 -200°C 下，將緩沖液儲(chǔ)存在 40°C 下。儲(chǔ)存緩沖液中的甘油可防止在 -20°C 下凍結(jié)，但 Thesit 在此溫度下會(huì)導(dǎo)致一些稠化?？梢赃x擇，但建議在分配前在冰上加熱至 0°C。對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存，可以使用 -70°C 或 -80°C，但我們建議酶不要冷凍多次。重新冷凍和解凍會(huì)導(dǎo)致酶活性降低。儲(chǔ)存緩沖液為 50% 甘油（v/v；63% w/v）、50 mM 硫酸銨、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巰基乙醇、無(wú)明膠和 0.5% Thesit。                 濃度：5   KlenTaq1™單位（72°C 下 30 分鐘內(nèi)摻入 60 nmole）。以活化的鮭魚精子DNA為模板； PC2（見下文）是緩沖區(qū)。請(qǐng)注意，這些單位比標(biāo)準(zhǔn)單位大 6 倍。以標(biāo)準(zhǔn)單位（10 nmole/30 分鐘）計(jì)算，此處的酶濃度約為 30 單位/ml。                    盡管該酶在多種條件下都能良好發(fā)揮作用，但推薦的反應(yīng)緩沖液 PC2 為：50 mM Tris-HCl pH 9.1、16 mM 硫酸銨、3.5 mM MgCl2 和 150 mg/ml BSA（隨訂單提供） 。請(qǐng)注意，與其他熱穩(wěn)定性 DNA 聚合酶緩沖液相比，不含 KC1 和明膠。 dNTP 濃度可以從每個(gè) 50 µM 到每個(gè) 1.2 mM 不等，但通常使用 200 µM。如果 DNA 摻入超過(guò) 500 bp，您將需要比 Taq 蛋白更多的KlenTaq1™蛋白。 KlenTaq1™ 的運(yùn)輸濃度為 25-30 u/μl，因此如果使用與全長(zhǎng) Taq DNA 聚合酶相同的數(shù)量（羅氏推薦），它可以輕松摻入 2000 bp。

jembio專注于DNA修飾酶，特別是TAQ DNA聚合酶。KlenTaq1和KlenTaq-S是我們的主要銷售產(chǎn)品。

上海寶葉生物科技有限公司

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